การทำอาหารเลี้ยงเชื้อรา (PDA) อย่างง่าย

Microbiology 11 ธันวาคม พ.ศ. 2565 1,430
Home / Articles / 29

ใน Projects นี้จะเป็นการสาธิตวิธีการทำ จานอาหารเลี้ยงเชื้อรา (Agar plates) สูตร PDA (Potato + Dextrose + Agar) เองจากวัตถุดิบที่หาได้ง่าย ราคาถูก สำหรับเพาะเลี้ยงเชื้อรา ขยายเชื้อ ทำหัวเชื้อ ซึ่งสูตร PDA เป็นสูตรที่นิยมใช้กัน แม้จะไม่ได้ให้ผลลัพท์ดีที่สุดก็ตาม

อุปกรณ์ที่ต้องใช้

  1. ขวดอาหารเลี้ยงเชื้อ ขวดนี้มีคุณสมบัติสามารถนำไปนึ่งฆ่าเชื้อได้
  2. มันฝรั่ง
  3. ผงวุ้นทำขนม (Agar agar)
  4. น้ำตาล Dextrose
  5. จานเพาะเชื้อ (แก้ว)
  6. หม้อนึ่งแรงดัน
  7. Aluminium foil (สำหรับห่อจานเพาะเชื้อ)
  8. Paraflim หรือ Plastic Wrap

สัดส่วน

ปริมาณ ส่วนผสม
200ml น้ำมันฝรั่ง
4g น้ำตาล Dextrose
4g ผงวุ้น

เพิ่มเติม: น้ำตาล Dextrose มีชื่อไทยว่า น้ำตาลทางด่วน สามารถซื้อได้ที่ร้านขายอุปกรณ์ทำอาหาร เช่น ร้านหยก

1

1) ผสมมันฝรั่งที่หั่นแล้วกับน้ำ เติมให้ได้ประมาณ 350ml ต่อมันฝรั่งขนาดปานกลางหนึ่งลูก

2

2) ต้มน้ำกับมันฝรั่งจนกว่ามันฝรั่งจะนุ่มลง ใช้เวลาประมาณ 20 นาที

3 4

3) เมื่อต้มเสร็จแล้วให้กรองเอาเพียงน้ำของมันฝรั่ง ใส่ลงในขวดอาหารเลี้ยงเชื้อ

5

4) เติม น้ำตาลทางด่วน (Dextrose) ปริมาณ 4 กรัม ต่อน้ำมันฝรั่ง 200ml

5) เติมผงวุ้นทำขนม (Agar agar) ปริมาณ 4 กรัม ต่อน้ำมันฝรั่ง 200ml

6

7

8

6) นำไปนึ่งฆ่าเชื้อในหม้อนึ่งแรงดัน 30 นาที โดยเริ่มจับเวลาหลังความดันถึง 15psi ให้หมุนฝาขวดอาหารเลี้ยงเชื้อให้หลวมปานกลาง สำหรับความดันในขวดที่จะขยายตัวขณะนึ่ง

สรุปขั้นตอนทั้งหมด

  1. การทำน้ำ มันฝรั่ง สามารถทำได้โดยที่นำมันฝรั่งมาหั่น และนำมาต้ม และกรองเอาเฉพาะน้ำของมันฝรั่ง ซึ่งสามารถใช้ความเข้มข้นตามที่ต้องการ
  2. ผสมน้ำของมันฝรั่งกับน้ำตาล dextrose และผงวุ้น ลงในขวดอาหารเลี้ยงเชื้อ และปิดฝา โดยให้ฝาหลวมปานกลาง เนื่องจากในขณะที่นึ่งฆ่าเชื้อจะเกิดแรงดันขึ้นในขวด และเมื่อนึ่งฆ่าเชื้อเสร็จแล้ว ฝาจะกลับมาปิดแน่น
  3. นำขวด และจานเพาะเชื้อ (ที่ห่อมิดชิดด้วย aluminium foil เพื่อป้องกันความชื้นเข้าไปในจาน) เข้าไปนึ่งในหม้อนึ่งแรงดัน โดยจับเวลาหลังจากความดันถึง 15psi ระยะเวลา 30 นาที
  4. เมื่อครบ 30 นาทีแล้ว และความดันของหม้อตกลงอยู่ในระดับที่ปลอดภัย ให้นำอาหารและจานออกมาจากหม้อและวางทิ้งไว้ รอจนกว่าขวดอาหารเลี้ยงเชื้อร้อนน้อยลง ให้อยู่ในระดับที่ร้อนแต่สามารถจับขวดได้
  5. ฆ่าเชื้อที่ฝากขวด และ foil ห่อจาน และนำอาหารเลี้ยงเชื้อ เทใส่จาน โดยให้ทำใน Still Air Box หรือ กล่องเขี่ยเชื้อ
  6. ทิ้งจานอาหารเลี้ยงเชื้อไว้ในกล่องเขี่ยเชื้อให้อาหารเย็นลง จนกลายเป็นวุ้น จึงจะสามารถนำพลาสติกใส หรือ parafilm พันรอบจานเพื่อป้องกันการปนเปื้อนจากภายนอก และนำจานออกมาจากกล่องเขี่ยเชื้อได้
  7. สังเกตการปนเปื้อนในอาหารเลี้ยงเชื้อภายในระยะเวลา 3 วันแรกก่อน จึงจะสามารถนำไปใช้งานได้
Profile Picture.
  • Name (Pen name): Sunny Jirakit (Sunny420x)
  • Study: Bachelor Degree of Computer Science from Chiang Mai Rajabhat University
  • Personality: Architect (INTJ-T)
  • Experience: JavaScript,  Angular.js, React.js, Next.js  Express.js, Unity C#, Socket.io